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ANP32A慢病毒激活颗粒(m2) | sc-419111-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Anp32a 基因编码 ANP32A,这是一种保守的酸性核磷蛋白,作为组蛋白伴侣并调控染色质组织,从而影响转录调控与细胞周期进程;ANP32A 参与多种核内过程,包括 mRNA 加工以及与蛋白磷酸酶 2A(PP2A)相关的信号传导,并通过与调控性蛋白复合体相互作用而被认为参与控制细胞凋亡与细胞应激反应;ANP32A 活性改变与神经退行性变、肿瘤生物学和炎症信号等相关表型有关,因此是利用小鼠模型研究基因型—表型关系的有用位点;对 Anp32a 进行基因编辑有助于在原代细胞和体内系统中开展对表观遗传调控、核内信号网络及疾病相关通路的机制性研究。
ANP32A 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Anp32a 表达。
ANP32A 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Anp32a转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ANP32A表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Anp32a 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。