Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AMPKβ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402952-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMPKβ1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AMPKβ1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AMPKβ1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRKAB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AMPKβ1 Anticorpo (Z14): sc-100357
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMPKβ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402952-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AMPKβ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402952-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKAB1 codifica a subunidade reguladora β1 da proteína quinase ativada por AMP (AMPK), um sensor central do estado energético celular que integra a disponibilidade de nutrientes com a demanda metabólica. A AMPKβ1 dá suporte à montagem e à estabilidade do complexo heterotrimérico da AMPK e contribui para o direcionamento de substratos e a associação ao glicogênio, moldando programas de fosforilação que restringem vias anabólicas e promovem processos catabólicos geradores de ATP. Por meio da sinalização da AMPK, PRKAB1 influencia a regulação de mTORC1, a autofagia, a oxidação de ácidos graxos e a homeostase da glicose em resposta ao estresse energético. Alterações na atividade da via da AMPK têm sido associadas à disfunção metabólica e à reprogramação, ligada ao câncer, de redes de crescimento e adaptação ao estresse, tornando PRKAB1 um nó útil para estudos mecanísticos de sinalização dependente de energia.
AMPKβ1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRKAB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRKAB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRKAB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRKAB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.