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AMPK alpha 2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400277-LAC | 200 µl | $455.00 |
PRKAA2 编码 AMP 活化蛋白激酶(AMPK)的催化性 α2 亚基。AMPK 是细胞内关键的能量感受器,负责协调细胞对营养与能量压力的适应。AMPKα2 通过整合 AMP/ADP 与 ATP 比值变化的信号,调控多种代谢通路,包括脂肪酸氧化、葡萄糖摄取、线粒体生物发生,并通过 mTORC1 及相关效应因子抑制合成代谢程序。在人体细胞中,AMPKα2 的活性会影响自噬、氧化还原稳态以及细胞周期控制,使 PRKAA2 与代谢综合征、2 型糖尿病、心血管重构以及癌症相关的代谢重编程研究密切相关。其同工型选择性的作用也支持对组织特异性能量平衡、线粒体动态以及应激反应信号通路的研究。
AMPK alpha 2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PRKAA2 表达。
AMPK alpha 2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PRKAA2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性AMPK alpha 2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PRKAA2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。