Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Alix: sc-400350-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Alix correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Alix Double Nickase (h) et le plasmide Alix Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PDCD6IP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Alix Antibody (1A12): sc-53540
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Alix | sc-400350-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Alix | sc-400350-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDCD6IP code Alix, une protéine adaptatrice associée à l'ESCRT qui coordonne des événements de remodelage membranaire, notamment la biogenèse des corps multivésiculaires, le tri du cargo endosomal et la biogenèse des exosomes. Alix interagit avec des composants des complexes ESCRT-I/III ainsi qu'avec des partenaires tels que TSG101 et CHMP4 pour soutenir l'abscission cytokinétique, la réparation de la membrane plasmique et la diminution de l'expression des récepteurs, ce qui la relie aux sorties de signalisation des facteurs de croissance et du système immunitaire. Grâce à ses rôles dans le trafic endolysosomal et les processus de bourgeonnement, Alix est fréquemment étudiée dans le contexte de la sortie virale, de la dynamique membranaire liée à l'autophagie et de l'homéostasie neuronale. Une dérégulation du trafic dépendant de PDCD6IP a été associée à des altérations de la signalisation via les vésicules extracellulaires et des voies de protéostase, pertinentes pour la biologie du cancer, la neurodégénérescence et les états inflammatoires.
Alix Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PDCD6IP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PDCD6IP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PDCD6IP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PDCD6IP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.