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Aldose Reductase双切口酶质粒(h) | sc-401437-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aldose Reductase双切口酶质粒(h2) | sc-401437-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKR1B1 编码人类醛糖还原酶(aldose reductase),这是一种依赖 NADPH 的醛-酮还原酶,催化将葡萄糖还原为山梨醇,是多元醇通路的第一步。醛糖还原酶通过消耗 NADPH 并促进山梨醇积累,可影响细胞氧化还原平衡、渗透压应激反应以及下游果糖代谢,并与氧化应激和羰基解毒过程相互交织。AKR1B1 的活性常在与高血糖相关的代谢应激、炎症相关信号传导以及组织对氧化损伤的易感性等背景下进行研究。在实验模型中,多元醇通路通量失衡以及醛类处理改变,已与糖尿病并发症及更广泛的代谢性疾病表型的相关机制联系起来。
Aldose Reductase 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AKR1B1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AKR1B1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AKR1B1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AKR1B1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。