CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
Aldolase C Double Nickaseプラスミド (h): sc-400988-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Aldolase C Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Aldolase Cダブルニカースプラスミド（h）およびAldolase Cダブルニカースプラスミド（h2）は、ALDOCを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Aldolase C 抗体 (H-11): sc-271593
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Aldolase C Double Nickaseプラスミド (h) | sc-400988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aldolase C Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-400988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトのALDOCは、解糖系酵素であるアルドラーゼCをコードしており、フルクトース-1,6-ビスリン酸をトリオースリン酸へと可逆的に開裂する反応を触媒します。これにより、炭水化物代謝が細胞内ATP産生および生合成フラックスと結び付けられます。アルドラーゼCは中枢神経系で高発現しており、神経細胞およびグリア細胞の代謝状態の指標としてしばしば用いられます。その機能は解糖系、エネルギーホメオスタシス、ならびに酸化還元バランスと交差する役割を担います。ALDOC発現の変化や代謝リプログラミングは神経機能障害と関連づけられており、また、解糖系経路の再構築が増殖やストレス適応を支える腫瘍のさまざまな状況においても観察されています。代謝の結節点としてのALDOCは、解糖依存性シグナル伝達、細胞ストレス応答、組織特異的なエネルギー代謝制御を研究するための扱いやすい入口となります。
Aldolase C ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ALDOC 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ALDOC内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ALDOCの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ALDOCが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。