Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402168-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ALDH3A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Anticorpo (G-2): sc-376089
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALDH3A1 codifica a aldeído desidrogenase 3A1, uma enzima citosólica dependente de NAD(P)+ que oxida aldeídos alifáticos e aromáticos reativos aos seus correspondentes ácidos carboxílicos. Ao desintoxicar subprodutos da peroxidação lipídica e aldeídos exógenos, a ALDH3A1 ajuda a manter a homeostase redox, limita a formação de adutos aldeído-proteína e contribui para a defesa celular contra o stress oxidativo e eletrofílico. A sua atividade cruza-se com vias mais amplas do metabolismo de aldeídos, redes antioxidantes dependentes de glutationa e programas transcricionais de resposta ao stress. Alterações na expressão ou na função de ALDH3A1 têm sido investigadas em contextos que envolvem adaptação do epitélio ao stress, danos associados à inflamação e remodelação metabólica relacionada com a carcinogénese.
Aldehyde dehydrogenase 3-A1/ALDH3A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ALDH3A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ALDH3A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ALDH3A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ALDH3A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.