Plásmido Doble Nickase (h) AHRR: sc-412812-NIC

El AHRR humano (represor del receptor de hidrocarburos aromáticos, *aryl-hydrocarbon receptor repressor*) codifica un regulador transcripcional inducible por ligando que atenúa la señalización de AHR mediante inhibición por retroalimentación, modulando el metabolismo de xenobióticos y las respuestas celulares al estrés. Al competir por ARNT y reclutar complejos correpresores, AHRR modula programas transcripcionales vinculados a la inducción de la familia CYP1, el estrés oxidativo y la expresión de genes inflamatorios. La actividad de AHRR se entrecruza con vías que regulan la diferenciación epitelial, la modulación inmunitaria y la respuesta ambiental, por lo que es relevante para estudiar cómo las redes transcripcionales sensibles a la exposición contribuyen a fenotipos asociados a enfermedad. La regulación alterada de AHRR y su estado de metilación se han asociado con firmas transcripcionales relacionadas con la exposición y se han investigado en contextos que incluyen la biología del cáncer, los mecanismos de enfermedad pulmonar y la desregulación inmunitaria.

AHRR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AHRR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AHRR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AHRR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AHRR alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.