Agmatinase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405176-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AgmatinaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Agmatinase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Agmatinase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AGMAT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Agmatinase Anticorpo (G-12): sc-166414
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Agmatinase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405176-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Agmatinase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405176-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGMAT codifica a agmatinase, uma metaloenzima dependente de manganês que hidrolisa a agmatina em putrescina e ureia, conectando o metabolismo da agmatina derivada da arginina à rede biossintética de poliaminas. Ao regular a disponibilidade de putrescina, a agmatinase influencia os níveis a jusante de espermidina e espermina, que sustentam o empacotamento de ácidos nucleicos, o controle da tradução e a progressão do ciclo celular. A atividade de AGMAT também se cruza com o fluxo de arginina relacionado ao óxido nítrico e com respostas celulares ao estresse ao modular a agmatina, uma amina bioativa com papéis neuromoduladores e de sinalização metabólica. A desregulação da homeostase de poliaminas e alterações no metabolismo de agmatina/arginina têm sido associadas à biologia do câncer, à neurobiologia e a fenótipos inflamatórios, tornando o AGMAT um alvo útil para estudos mecanísticos de reprogramação metabólica.
Agmatinase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AGMAT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AGMAT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AGMAT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AGMAT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.