Adipsin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401782-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AdipsinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adipsin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adipsin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CFD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adipsin Anticorpo (D10/4): sc-47683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adipsin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401782-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adipsin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401782-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator D do complemento (CFD), também conhecido como adipsina, é uma protease de serina que atua como a enzima limitante da via alternativa do complemento, clivando o fator B na presença de C3b para gerar a convertase de C3. Por meio dessa função, ele modula a amplificação do complemento, a opsonização e a sinalização inflamatória, conectando a imunidade inata à homeostase tecidual. O CFD é altamente expresso no tecido adiposo e tem sido implicado no crosstalk entre a regulação metabólica e a ativação imune. A atividade do complemento desregulada envolvendo o CFD está associada a fenótipos inflamatórios e metabólicos e é frequentemente estudada no contexto da biologia do tecido adiposo, da lesão tecidual mediada por complemento e de mecanismos de doença mediados pelo sistema imune.
Adipsin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CFD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CFD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CFD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CFD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.