Adenosine A2B-R Double Nickaseプラスミド (h): sc-401402-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Adenosine A2B-R Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Adenosine A2B-Rダブルニカースプラスミド（h）およびAdenosine A2B-Rダブルニカースプラスミド（h2）は、ADORA2Bを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Adenosine A2B-R Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401402-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenosine A2B-R Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401402-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADORA2B は、ヒトのアデノシン A2B 受容体（A2B-R）をコードする遺伝子であり、代謝ストレスを受けた組織で上昇する細胞外アデノシンを感知する低親和性の G タンパク質共役型受容体（GPCR）である。A2B-R は主に Gs に共役して cAMP/PKA シグナル伝達を増強し、さらに Gq/PLC 経路も介して、CREB などの下流エフェクターを通じて転写プログラムを形成する。この受容体は、血管トーンと透過性、炎症性メディエーターの放出、免疫細胞のトラフィッキング、線維芽細胞の活性化を調節し、プリン作動性シグナルを組織リモデリングに結び付けている。ADORA2B 活性の異常は、気道疾患、虚血性障害、線維化、腫瘍微小環境の生物学に関連する低酸素および炎症関連プロセスへの関与が示唆されている。
Adenosine A2B-R ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ADORA2B 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ADORA2B内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ADORA2Bの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ADORA2Bが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。