Adducin β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402277-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adducin βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adducin β (h) e o Plasmídeo Double Nickase Adducin β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADD2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Adducin β Anticorpo (E-11): sc-376063
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adducin β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402277-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adducin β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402277-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADD2 codifica a aducina β, uma proteína do citoesqueleto associada à membrana que forma heterotetrâmeros com a aducina α/γ para “caper” (tamponar) e agrupar filamentos de actina e promover a montagem da rede espectrina–actina no citoesqueleto cortical. Por meio da regulação da remodelação da actina e da estabilidade da membrana, a aducina β contribui para o controle da forma celular, a dinâmica de adesão e a resiliência mecânica — processos frequentemente coordenados pela sinalização de GTPases da família Rho e pela modulação da atividade da aducina dependente de fosforilação. Em células eritroides e em outros tecidos sujeitos a estresse mecânico, a função adequada da aducina sustenta a integridade do citoesqueleto e a organização da membrana. Alterações genéticas e funcionais em complexos de aducina têm sido investigadas em distúrbios de fragilidade de membrana e de mecânica celular alterada, incluindo defeitos do citoesqueleto de hemácias e contextos mais amplos em que a remodelação do citoesqueleto está desregulada.
Adducin β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADD2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADD2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADD2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADD2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.