ADAMTS-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407094

概要

ADAMTS10は、分泌型の亜鉛依存性メタロプロテアーゼであるADAMTSファミリーのADAMTS-10をコードしており、細胞外マトリックス（ECM）の構築や結合組織の恒常性維持に寄与します。ADAMTS-10はフィブリリン微小線維と相互作用し、プロテオグリカンに富むマトリックスのリモデリングに関与することで、発生および維持過程における細胞—マトリックス間シグナル伝達や組織構築に影響を与えます。ADAMTS10の機能異常は、Weill–Marchesani症候群を含む遺伝性結合組織疾患と関連づけられており、微小線維の完全性、眼および骨格の表現型、ならびに細胞外マトリックスのリモデリングという観点から研究されています。

ADAMTS-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAMTS10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAMTS10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAMTS10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAMTS-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAMTS-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAMTS10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAMTS-10の機能に不可欠なADAMTS10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAMTS10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAMTS-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADAMTS-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAMTS10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAMTS-10 HDRプラスミド（h）および ADAMTS-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAMTS10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAMTS10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。