ACSL1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-420278-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- ACSL1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- ACSL1ダブルニカースプラスミド（m）およびACSL1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Acsl1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
ACSL1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-420278-NIC | 20 µg | $410.00 |
マウスのAcsl1は、長鎖アシルCoA合成酵素ファミリーのメンバー1（ACSL1）をコードしており、長鎖遊離脂肪酸を対応するアシルCoAチオエステルへ変換する酵素です。この反応は、脂質を下流の代謝へと振り分ける「ゲート」となる段階で、以後の代謝運命を決定づけます。ACSL1は、トリグリセリド合成、リン脂質の代謝回転、脂肪酸分解（異化）などの経路に供給されるアシルCoAの可用性を制御することで、ミトコンドリアβ酸化、脂質の貯蔵とリモデリング、さらには全身的なエネルギー恒常性を支えています。代謝活性の高い組織や免疫細胞の文脈では、ACSL1活性が脂質駆動性のシグナル伝達や炎症プログラムに影響し、Acsl1の制御が代謝ストレス応答と結び付くことが示唆されます。ACSL1の発現や活性の変化は、インスリン抵抗性、脂肪肝（脂肪沈着）、およびマウスの心代謝疾患モデルに関連する脂質代謝の破綻表現型と関連しています。
ACSL1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Acsl1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Acsl1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Acsl1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Acsl1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。