ACOT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407262-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACOT8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACOT8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACOT8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACOT8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACOT8 Anticorpo (C-3): sc-7343
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACOT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACOT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACOT8 codifica a acil-CoA tioesterase 8, uma enzima peroxissomal que hidrolisa tioésteres de acil-CoA de ácidos graxos em ácidos graxos livres e coenzima A, ajudando a regular a disponibilidade de CoA intraperoxissomal e o tamanho do pool de acil-CoA. Ao modular o fluxo de substratos pela β-oxidação peroxissomal e pela remodelação lipídica, a ACOT8 contribui para a homeostase lipídica celular e o equilíbrio redox. Sua atividade se integra a processos mais amplos associados aos peroxissomos, incluindo o processamento de ácidos graxos de cadeia muito longa e a coordenação com a oxidação mitocondrial de ácidos graxos. A desregulação de vias do metabolismo lipídico peroxissomal envolvendo ACOT8 tem sido investigada no contexto de fenótipos metabólicos e inflamatórios, nos quais a utilização alterada de ácidos graxos e o estresse oxidativo são relevantes.
ACOT8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACOT8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACOT8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACOT8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACOT8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.