Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACE2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401131-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ACE2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ACE2 Double-Nickase-Plasmid (h) und ACE2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ACE2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ACE2: sc-390851
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ACE2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACE2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Angiotensin-konvertierendes Enzym 2 (ACE2) ist eine zinkabhängige Carboxypeptidase, die das Renin–Angiotensin-System ausbalanciert, indem sie Angiotensin II in Angiotensin-(1–7) umwandelt und dadurch die Signalübertragung von vasokonstriktiven, proinflammatorischen Achsen hin zu MAS-Rezeptor-gekoppelten Signalwegen verschiebt. Humanes ACE2 wird auf epithelialen und endothelialen Oberflächen exprimiert und trägt zur Regulation des Gefäßtonus, zum Gewebeumbau, zu Reaktionen auf oxidativen Stress sowie zur inflammatorischen Signalübertragung bei. Neben seiner enzymatischen Rolle beeinflusst ACE2 das Rezeptor-Trafficking und Netzwerke membranständiger Proteasen, die die Proteostase an der Zelloberfläche mitprägen. Eine dysregulierte ACE2-Expression oder -Aktivität wurde mit kardiovaskulärer und renaler Pathologie, metabolischer Inflammation und Störungen der epithelialen Barrierefunktion in Verbindung gebracht, was ACE2 zu einem zentralen Ziel für mechanistische Studien der Wirtsantwort und der Gewebehomöostase macht.
ACE2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ACE2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ACE2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ACE2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ACE2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.