ACE2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401131-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACE2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACE2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACE2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACE2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACE2 Anticorpo (E-11): sc-390851
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACE2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACE2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A enzima conversora de angiotensina 2 (ACE2) é uma carboxipeptidase dependente de zinco que contrabalança o sistema renina–angiotensina ao converter a angiotensina II em angiotensina-(1–7), deslocando assim a sinalização de eixos vasoconstritores e pró-inflamatórios para vias associadas ao recetor MAS. A ACE2 humana é expressa em superfícies epiteliais e endoteliais e contribui para a regulação do tónus vascular, da remodelação tecidular, das respostas ao stresse oxidativo e da sinalização inflamatória. Para além do seu papel enzimático, a ACE2 influencia o tráfego de recetores e redes de proteases de membrana que moldam a proteostase na superfície celular. A expressão ou atividade desregulada da ACE2 tem sido associada a patologia cardiovascular e renal, inflamação metabólica e disfunção da barreira epitelial, tornando-a um alvo central para estudos mecanísticos da resposta do hospedeiro e da homeostase tecidular.
ACE2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACE2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACE2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACE2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACE2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.