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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACADL Plasmídeo de ativação de CRISPR (h) | sc-404535-ACT | 20 µg | $397.00 |
ACADL codifica a acil-CoA desidrogenase de cadeia longa (ACADL), uma flavoproteína mitocondrial que catalisa a primeira etapa de desidrogenação na β-oxidação de acil-CoAs de ácidos graxos de cadeia longa. Ao controlar o catabolismo de ácidos graxos, a ACADL contribui para a produção de energia celular, o equilíbrio redox e a flexibilidade metabólica, particularmente em tecidos com alta capacidade oxidativa. Alterações na atividade da ACADL têm sido associadas a perturbações no manejo de lipídios e à disfunção mitocondrial, com relevância para erros inatos da oxidação de ácidos graxos e para fenótipos metabólicos e cardiometabólicos mais amplos estudados em modelos de células humanas.
ACADL O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de ACADL sem alterar a sequência de ADN subjacente.
ACADL O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus ACADL em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição ACADL, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de ACADL. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus ACADL nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de ACADL no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via ACADL em células tumorais com expressão de ACADL silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.