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Abin-1慢病毒激活颗粒(m) | sc-425441-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Tnip1 基因编码 ABIN-1(A20 结合型 NF-κB 抑制因子),这是一种可结合泛素的衔接蛋白,通过协调依赖泛素的蛋白复合体,在 TNFR、TLR 等受体下游调控炎症信号传导。ABIN-1 可与去泛素化酶 A20/TNFAIP3 相互作用,抑制 NF-κB 与 MAPK 通路的激活,从而影响细胞因子产生、先天免疫稳态以及细胞生存等命运决策。TNIP1/ABIN-1 功能失调与异常免疫激活和炎症表型相关,因此它是研究信号终止、泛素链识别以及免疫细胞与基质细胞环境中转录调控的一个重要节点。
Abin-1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Tnip1 表达。
Abin-1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Tnip1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Abin-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Tnip1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。