A1BG Double Nickaseプラスミド (h): sc-403087-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- A1BG Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- A1BGダブルニカースプラスミド（h）およびA1BGダブルニカースプラスミド（h2）は、A1BGを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: A1BG 抗体 (F-9): sc-374415
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
A1BG Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A1BG Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Alpha-1B-グリコプロテイン（A1BG）は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する分泌性の血漿糖タンパク質をコードしており、主に肝臓で産生され、血中循環および細胞外液中で検出されます。分子機能の詳細はなお完全には解明されていないものの、A1BGは細胞外タンパク質相互作用ネットワーク、糖タンパク質の代謝回転、ならびに血漿プロテオームに影響を与える全身性の炎症・代謝状態といった文脈で頻繁に研究されています。A1BGの量的変動は、複数の疾患関連プロテオミクスプロファイルにおいて報告されており、トランスレーショナル研究の探索ワークフローにおけるバイオマーカー関連標的としての活用可能性を支持しています。細胞・組織モデルでは、A1BGを解析することで、分泌タンパク質ダイナミクスを、宿主応答、組織リモデリング、微小環境シグナル伝達を制御する経路と結び付けて理解する手がかりとなります。
A1BG ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における A1BG 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、A1BG内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、A1BGの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、A1BGが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。