α1b Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400021-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1b TubulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α1b Tubulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase α1b Tubulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUBA1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1b Tubulin Anticorpo (1H10): sc-134238
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1b Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α1b Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA1B codifica a tubulina α1b, um componente estrutural central dos microtúbulos que impulsiona a organização do citoesqueleto, o transporte intracelular e a dinâmica do fuso mitótico. Heterodímeros de tubulina α/β polimerizam-se para regular processos como a segregação cromossômica, a polaridade celular e o tráfego de vesículas, sendo centrais em vias que controlam a progressão do ciclo celular e a sinalização dependente de microtúbulos. Alterações na expressão de tubulina e na dinâmica dos microtúbulos estão frequentemente associadas à instabilidade cromossômica e à proliferação aberrante, tornando TUBA1B um alvo útil para estudar mecanismos subjacentes à biologia tumoral e às respostas ao estresse diante de perturbações do citoesqueleto. Como um gene do citoesqueleto amplamente expresso, TUBA1B também dá suporte a pesquisas sobre diferenciação neuronal e transporte axonal, nos quais a integridade dos microtúbulos é essencial.
α1b Tubulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUBA1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUBA1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUBA1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUBA1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.