SPRYD4の化学的活性化因子は、様々な細胞内メカニズムに関与し、シグナル伝達におけるタンパク質の機能を高めることができる。フォルボール12-ミリスチン酸13-アセテート(PMA)は、プロテインキナーゼC(PKC)の強力な活性化因子であり、SPRYD4をリン酸化してその活性を高める。フォルスコリンは、細胞内のcAMPレベルを上昇させることにより、プロテインキナーゼA(PKA)を活性化し、SPRYD4をリン酸化の標的にすることができる。同様に、cAMPアナログであるジブチリル-cAMPは、PKAに作用してSPRYD4をリン酸化し、その機能を増強する。イオノマイシンは、細胞内カルシウムレベルを上昇させ、SPRYD4をリン酸化するカルシウム/カルモジュリン依存性プロテインキナーゼ(CaMK)を活性化し、SPRYD4を活性化する。さらに、オカダ酸は、SPRYD4を脱リン酸化し不活性化するタンパク質リン酸化酵素を阻害することにより、SPRYD4を活性状態に維持することができる。
アニソマイシンは、ストレス活性化プロテインキナーゼ(SAPK)を活性化し、このSAPKは、細胞ストレス応答の一部として、SPRYD4をリン酸化し活性化する。スフィンゴシン1リン酸は、受容体を介したシグナル伝達により、SPRYD4のリン酸化と活性化につながるキナーゼカスケードを開始する。タプシガルギンは、細胞質カルシウムレベルを上昇させることにより、SPRYD4をリン酸化するキナーゼを間接的に活性化する。ブレフェルジンAはゴルジ体の機能を破壊し、SPRYD4に作用しうる細胞性キナーゼを間接的に活性化する。ゾレドロン酸はメバロン酸経路を破壊し、SPRYD4をリン酸化し活性化するキナーゼを活性化する。さらに、カリクリンAは、特定のタンパク質リン酸化酵素を阻害することにより、SPRYD4の持続的なリン酸化と活性化に寄与する。最後に、上皮成長因子(EGF)は、その受容体シグナル伝達カスケードを引き起こし、SPRYD4をリン酸化し活性化する下流キナーゼの活性化につながり、SPRYD4が機能的に活性化されるメカニズムの多様性を示している。
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