Ero1-Lαの活性化物質には、細胞内や生化学的環境、特に小胞体(ER)内を調節することでタンパク質の活性に影響を与える様々な化学物質が含まれる。これらの活性化因子はEro1-Lαと直接相互作用はしないが、Ero1-Lαの機能を助長するような状態を作り出す間接的な経路を通して効果を発揮する。例えば、グルコースやグリセロールのような薬剤は、ERのタンパク質折り畳み能力を高め、酸化的タンパク質折り畳みにおけるEro1-Lαの役割を考えると、Ero1-Lα活性を刺激することができる。同様に、過酸化水素やデフェロキサミンのような化学物質は、細胞内の酸化還元バランスを調整し、Ero1-Lαが新生タンパク質にジスルフィド結合を形成するのに重要なERの酸化的環境に影響を与える。
N-アセチルシステインやβ-メルカプトエタノールなどの他の化合物は、一般に還元剤と考えられているが、逆説的にERの酸化的フォールディング能力を高め、Ero1-Lαの活性を増加させる。A23187のようなカルシウムイオノフォアは、細胞内のカルシウムレベルを上昇させ、Ero1-Lαの活性に有利な環境を促進する。さらに、4-フェニル酪酸ナトリウムや4-フェニル酪酸のような化学シャペロンは小胞体ストレスを緩和し、Ero1-Lαの機能にとってより好ましい環境を作り出す。最後に、亜鉛やセレンのような微量栄養素は、細胞の酸化還元状態を維持する役割を果たし、それらの存在はEro1-Lα活性の調節に不可欠である。
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