精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dの化学的活性化剤は、そのリン酸化とそれに続く活性化を達成するために、様々な細胞経路を利用する。フォルボール12-ミリスチン酸13-アセテート(PMA)は、細胞シグナル伝達において極めて重要な酵素であるプロテインキナーゼC(PKC)を直接刺激し、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dをリン酸化する。一方、フォルスコリンは表面の受容体をバイパスしてアデニル酸シクラーゼを直接活性化し、細胞内のサイクリックAMP(cAMP)レベルを上昇させる。上昇したcAMPは、プロテインキナーゼA(PKA)を活性化する。PKAは、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dのリン酸化過程を含む、リン酸化過程に不可欠なもう一つの酵素である。イオノマイシンは、細胞内カルシウムを増加させることによって機能し、このカルシウムは、タンパク質をリン酸化することができるカルモジュリン依存性キナーゼを活性化する。同様に、Bay K8644はL型カルシウムチャネルアゴニストとしてカルシウム流入を増加させ、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dを標的とするキナーゼを活性化する別の経路を提供する。
エピネフリンとイソプロテレノールはともにアドレナリン受容体に作用し、cAMPの蓄積とPKAの活性化をもたらし、その結果、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dがリン酸化される。アニソマイシンはストレス活性化プロテインキナーゼ(SAPK)を活性化し、これもまたこのタンパク質をリン酸化の標的とする。オカダ酸とカリクリンAは、タンパク質リン酸化酵素を阻害することにより、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dの脱リン酸化を防ぎ、活性状態を維持する。タプシガルギンは細胞内Ca2+レベルを上昇させ、タンパク質をリン酸化するキナーゼを活性化する。最後に、3-イソブチル-1-メチルキサンチン(IBMX)とロリプラムは、cAMPを分解する酵素であるホスホジエステラーゼを阻害する。阻害の結果、cAMPレベルが持続し、PKA活性が持続するため、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dはリン酸化され、活性を維持する。それぞれの化学物質は、そのユニークなメカニズムを通して、精子形成関連31サブファミリーD、メンバー1Dの活性化という共通の終点に収束し、タンパク質の機能を制御する細胞内シグナル伝達経路の複雑なネットワークを浮き彫りにしている。
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