ZnT-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405830

Visão geral

SLC30A7 codifica o transportador de zinco ZnT-7, um membro da família SLC30 (ZnT) que medeia o efluxo de zinco do citosol para compartimentos intracelulares, sustentando a homeostase do zinco e a disponibilidade compartimentalizada de iões metálicos. Ao regular a distribuição de zinco na via secretora e no sistema endomembranar, o ZnT-7 influencia a atividade de metaloproteínas, o equilíbrio redox e processos de sinalização dependentes de zinco que moldam o metabolismo celular e as respostas ao stress. Alterações no transporte de zinco têm sido associadas a perturbações na biologia dos grânulos de insulina, na sinalização inflamatória e no stress oxidativo, tornando o SLC30A7 relevante em estudos de disfunção metabólica e de mecanismos complexos de doença relacionados. Como regulador da homeostase do zinco, o ZnT-7 também é pertinente para investigações da função de organelos e da maturação de enzimas dependentes de metais em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZnT-7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC30A7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC30A7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC30A7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZnT-7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC30A7 para a investigação da sinalização de ZnT-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC30A7 críticos para a função ZnT-7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC30A7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZnT-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ZnT-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC30A7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZnT-7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ZnT-7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC30A7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC30A7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.