ZNF575 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430383

概要

マウスのZfp575は、C2H2型ジンクフィンガーファミリーに属し、DNA結合性を有すると考えられる転写調節因子であるジンクフィンガータンパク質ZNF575をコードしています。このファミリーは、配列特異的な遺伝子発現制御に関与することが多いことで知られています。機能アノテーションはまだ限定的ですが、同クラスのタンパク質は一般に、クロマチンに関連した転写プログラムを調節し、細胞状態や分化、発生的・環境的シグナルへの応答に影響を与えるとされています。したがってZNF575は、組織特異的転写を形作る遺伝子制御ネットワークやエピジェネティック機構を検討するうえで重要な対象となります。ジンクフィンガーを介した転写制御の破綻は、増殖の異常、ゲノム安定性の変化、疾患関連の発現シグネチャーと広く関連づけられており、これらの文脈におけるZfp575の探索的研究を支持します。

ZNF575 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZfp575遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zfp575内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zfp575のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZNF575タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZNF575シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zfp575欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZNF575の機能に不可欠なZfp575エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zfp575ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZNF575 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZNF575 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zfp575遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZNF575 HDRプラスミド（m）および ZNF575 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZfp575ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZfp575標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。