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ZBTB11 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-411959-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZBTB11は、BTB/POZドメインを有する亜鉛フィンガー型転写因子をコードしており、クロマチンに関連した遺伝子発現制御や、適切な転写プログラムの維持に機能します。配列特異的なDNA結合と、コリプレッサーあるいはクロマチン修飾複合体のリクルートを介して、ZBTB11は細胞増殖、分化、ストレス応答性の転写などの細胞過程に影響を与えます。BTB-亜鉛フィンガー型転写制御因子の攪乱はエピジェネティック状態を再構築し、ゲノム安定性に関連する経路に影響し得るため、ZBTB11はヒト細胞における転写制御を研究するうえで有用な結節点となります。ZBTBファミリータンパク質が関与する転写因子ネットワークの破綻は、腫瘍性および発生関連の表現型と関連づけられており、臨床的有用性を示唆することなく、疾患に関連する制御回路の研究を後押しします。
ZBTB11 ダブルニカースプラスミド(h)は、human 細胞株における ZBTB11 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ZBTB11内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合(NHEJ)によって修復され、その結果、ZBTB11の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ZBTB11が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。