Particules Lentivirales d'Activation (h) Z39Ig: sc-404067-LAC

VSIG4 (Z39Ig) code un récepteur de la superfamille des immunoglobulines apparenté à la famille B7, exprimé majoritairement par les macrophages résidents des tissus, notamment les cellules de Kupffer. La protéine agit comme récepteur du complément pour des fragments de C3 et peut moduler l’activation de l’immunité innée en influençant la phagocytose et en atténuant les réponses des lymphocytes T, faisant le lien entre la biologie du complément, la présentation de l’antigène et une signalisation de type point de contrôle immunitaire. L’activité de VSIG4 recoupe des voies qui façonnent le niveau d’inflammation et la polarisation des macrophages au sein des tissus. Des altérations de l’expression de VSIG4 ont été associées à des phénotypes d’échappement immunitaire et à une inflammation portée par les macrophages dans des contextes tels que le cancer, les maladies du foie et le remodelage fibreux, ce qui soutient son utilisation comme marqueur et régulateur en recherche immunologique.

Les particules d'activation lentivirales Z39Ig (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de VSIG4 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Z39Ig (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription VSIG4, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Z39Ig. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif VSIG4 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.