Wnt-7a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423721
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wnt-7a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Wnt-7a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Wnt-7a Anticorpo (E-9): sc-365665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wnt-7a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423721 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Wnt7a codifica o ligante secretado Wnt-7a, um regulador-chave da sinalização Wnt que influencia a transcrição dependente de β-catenina, bem como os desfechos de vias não canônicas que controlam a dinâmica do citoesqueleto e a polaridade celular planar. Em tecidos de camundongo, Wnt-7a contribui para o padrão embrionário e a organogênese e ajuda a coordenar a especificação do destino celular, a proliferação e a migração por meio do engajamento de receptores Frizzled/LRP. Alterações na atividade de Wnt7a são frequentemente estudadas em contextos de programas de desenvolvimento aberrantes e de homeostase tecidual desregulada, nos quais o tônus da via Wnt e os circuitos de retroalimentação moldam estados de expressão gênica. Como um nó de via com amplos efeitos a jusante, Wnt-7a é comumente investigado por seus papéis na morfogênese, no comportamento de células-tronco/progenitoras e na remodelação da arquitetura tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-7a (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Wnt7a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Wnt7a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Wnt7a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-7a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Wnt7a para a investigação da sinalização de Wnt-7a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Wnt7a críticos para a função Wnt-7a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Wnt7a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Wnt-7a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Wnt-7a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Wnt7a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-7a Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Wnt-7a (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Wnt7a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Wnt7a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.