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WDR20慢病毒激活颗粒(h) | sc-418266-LAC | 200 µl | $455.00 |
WDR20 编码一种含 WD 重复序列的支架蛋白,作为去泛素化酶复合物的调控辅因子发挥作用,帮助协调依赖泛素的蛋白稳定性与信号传导调控。通过调节去泛素化过程,WDR20 影响细胞蛋白稳态(proteostasis)以及与细胞生长、应激反应和转录程序相关的通路动态。涉及 WDR20 的泛素信号网络发生扰动与细胞稳态改变有关,并且与泛素介导调控受破坏的疾病生物学相关,包括恶性转化和神经生物学功能障碍等情境。因此,WDR20 是解析去泛素化如何在人体细胞中微调通路输出与蛋白周转的一个有用节点。
WDR20 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 WDR20 表达。
WDR20 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在WDR20转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性WDR20表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 WDR20 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。