
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
VPS28 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-404226-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 VPS28 유전자는 ESCRT-I 복합체의 핵심 소단위를 암호화하며, 유비퀴틴화된 막 단백질의 엔도좀 분류를 조정하고 리소좀 분해로 이어지는 과정에서 다중소포체(multivesicular body) 형성을 촉진합니다. ESCRT 경로의 활성에 의해 VPS28은 수용체 발현 저하(downmodulation), 막 리모델링, 그리고 신호 감쇠 및 단백질 항상성(proteostasis)에 영향을 미치는 수송(trafficking) 사건들을 조절하는 데 기여합니다. 또한 ESCRT-I 기능은 숙주 막 절단(membrane scission) 기작을 이용하는 세포질분열 말기 절단(cytokinetic abscission) 및 바이러스 출아(viral budding) 과정과도 연결됩니다. 엔도리소좀 수송과 ESCRT 구성요소의 조절 이상은 성장인자 신호전달의 변화 및 세포 스트레스 표현형과 연관되며, 이는 암과 신경퇴행 연구에서 중요한 의미를 갖습니다.
VPS28 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 VPS28 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
VPS28 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 VPS28 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 VPS28 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 VPS28 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 VPS28 위치를 보존하고 내인성 위치에서 VPS28 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 VPS28 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 VPS28 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.