vinculin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400227-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- vinculinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase vinculin (h) e o Plasmídeo Double Nickase vinculin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VCL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:vinculin Anticorpo (7F9): sc-73614
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
vinculin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400227-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
vinculin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400227-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VCL codifica a vinculina, um adaptador do citoesqueleto que conecta integrinas e caderinas à rede de actina nas adesões focais e nas junções aderentes, estabilizando os contatos célula–matriz e célula–célula. A vinculina participa da mecanotransdução ao responder a forças de tração e coordenar a montagem de complexos de adesão, influenciando o espalhamento celular, a geração de tração e a migração. Por meio de interações com talina, paxilina, α-actinina e F-actina, ela integra vias de sinalização ligadas às GTPases da família Rho, ao remodelamento de actina e à dinâmica de renovação das adesões. Alterações na expressão de VCL ou na dinâmica de adesão têm sido associadas a comprometimento da integridade tecidual e a fenótipos de remodelamento, sendo frequentemente estudadas em contextos como invasão de células tumorais, estrutura de cardiomiócitos e respostas da matriz extracelular relacionadas à fibrose.
vinculin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VCL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VCL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VCL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VCL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.