Vigilin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404125-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VigilinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Vigilin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Vigilin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HDLBP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Vigilin Anticorpo (H-3): sc-271523
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Vigilin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404125-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Vigilin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404125-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HDLBP humano codifica a Vigilina, uma proteína multifuncional de ligação a RNA que contém múltiplos domínios KH e se associa a complexos mRNP para regular a estabilidade do mRNA, a localização subcelular e a tradução. A Vigilina participa de programas de controle pós-transcricional ligados à homeostase de lipídios e lipoproteínas, incluindo a regulação de transcritos envolvidos no manejo do colesterol e em respostas ao estresse metabólico. Por acoplar o metabolismo de RNA a vias de crescimento e adaptação celular, a atividade alterada de HDLBP/Vigilina tem sido investigada em contextos como metabolismo desregulado e modelos de doenças proliferativas em que redes regulatórias de RNA estão perturbadas. Essas propriedades fazem da Vigilina um alvo útil para dissecar mecanismos centrados em RNA que moldam os resultados de expressão gênica em células humanas.
Vigilin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDLBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDLBP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDLBP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDLBP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.