VEGF-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423666

概要

Vegfbは血管内皮増殖因子B（VEGF-B）をコードしており、VEGFファミリーに属する分泌性リガンドとして、主にVEGFR1（FLT1）およびニューロピリンを介してシグナルを伝達し、内皮細胞の挙動や血管の恒常性を調節します。強い血管新生作用を示すVEGF-Aとは対照的に、VEGF-Bは内皮細胞の生存、血管の安定化、ならびに高い酸化的需要をもつ組織における脂質取り込みと代謝の制御と関連づけられることが多いとされています。VEGF-B依存的なシグナル伝達はPI3K–AKT経路やMAPK経路と交差し、ミトコンドリア機能や脂肪酸輸送プログラムに影響を与え得ます。VEGF-B活性の変化は、血管機能障害や虚血性障害に対する組織の感受性などを含む、代謝ストレスや心血管生物学の文脈で研究されています。

VEGF-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVegfb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vegfb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vegfbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VEGF-Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VEGF-Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vegfb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VEGF-Bの機能に不可欠なVegfbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vegfbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VEGF-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびVEGF-B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vegfb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VEGF-B HDRプラスミド（m）および VEGF-B HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVegfbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVegfb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。