V-ATPase A2 Plasmidi CRISPR (m)

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- Specie target: mouse; corrispondente al human prodotto, veda V-ATPase A2 CRISPR Plasmids (h)
- I plasmidi CRISPR/Cas9 KO consistono in sequenze RNA guida di 20 nt specifici V-ATPase A2 derivate dalla libreria GeCKO (v2)
- Per il silenziamento genico CRISPR, le sequenze gRNA indirizzano la proteina CAS9 ad indurre una doppia rottura sito-specifica dei filamenti (DSB) nel DNA genomico
- Plasmidi CRISPR Target-specifici sia per knockout genico che attivazione sono disponibili. Si prega di fare riferimento alle informazioni dettagliate nelle schede tecniche dei prodotti below
- Tutti i prodotti sono venduti come DNA plasmidico purificato, pronto per la trasfezione, con l'esclusione delle particelle lentivirali d'attivazione che sono state preimpacchettate come Particelle lentivirali per l'utilizzo in cellule di difficile trasfezione

V-ATPase Anticorpi per l'analisi delle risposte cellulari ai prodotti CRISPR V-ATPase
V-ATPase Inhibitors per le analisi funzionali delle risposte cellulari a V-ATPase
Per ulteriori dettagli che descrivano il Sistema CRISPR clicca qui
I plasmidi di KO CRISPR/Cas9, Double Nickase e di attivazione CRISPR/dCas9 sono considerati un "Licensed Product" e sono da utilizzare in accordo con la Licenza Limitata click here.

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Specie	Nome del gene	Codice del gene	Locus cromosoma	Numero di accesso all'isoforma (mRNA)	Codice accesso proteina	Numero d'ordine
Mouse	Atp6v0a2	21871	5 F	NM_011596	P15920	N/A

Descrizione

20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
V-ATPase A2 Plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) consiste di un pool di tre plasmidi ciascuno codificante per la nucleasi Cas9 e un RNA guida 20 nt specifico V-ATPase A2 (gRNA) disegnato per una massima efficienza di knockout
le sequenze gRNA sono derivate dalla libreria GeCKO (v2) e dirigono la proteina Cas9 ad indurre un rottura double strand (DSB) sito-specifica nel DNA genomico (%link_11%)
Per la selezione delle cellule contenenti un DSB indotto con successo da Cas-9, è raccomandata la co-trasfezione con il V-ATPase A2 Plasmide HDR (m) (sc-423406-HDR).
contattare il Servizio Tecnico per la disponibilità dell'anticorpo di controllo

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Descrizione

20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
V-ATPase A2 Plasmide HDR (m) è raccomandato per co-trasfezione con V-ATPase A2 Plasmide CRISPR/Cas9 KO (m)
V-ATPase A2 HDR Plasmid (m) consiste in un pool di 2-3 plasmidi, ciascuno contenente un templato per riparazione di DNA homology-directed (HDR) corrispondente ai siti di taglio generati dal V-ATPase A2 Plasmide CRISPR/Cas9 KO (m)
Ciascun plasmide HDR contiene due braccia di omologia da 800 bp disegnate per legare specificamente il DNA genomico che circonda il corrispondente sito di rottura DNA double strand indotto dal Cas9
Ciascun Plasmide HDR inserisce un gene di resistenza alla puromicina per inattivare la selezione di cellule stabilmente knockout (KO) ed un gene RFP (Red Fluorescent Protein) per verificare visivamente la trasfezione
Il gene per la resistenza alla puromicina e per RFP sono affiancati da due siti LoxP per permettere l'ulteriore processamento da parte del Cre Vector sc-418923

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Descrizione

20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
V-ATPase A2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
I gRNA codificati da V-ATPase A2 Plasmide Double Nickase (m2) differiscono dai gRNA in V-ATPase A2 Plasmide Double Nickase (m)

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Descrizione

20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
V-ATPase A2 Plasmide di attivazione CRISPR (m) è un mediatore sinergico di attivazione (SAM) del sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente l'espressione genica
V-ATPase A2 CRISPR Activation Plasmid (m) consiste di tre plasmidi in proporzione 1:1:1 : un plasmide che codifica la nucleasi (D10A and N863A) Cas9 (dCas9) deattivata fusa al dominio di transattivazione VP64, ed un gene di resistenza alla blasticina; un plasmide che codifica per la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, ed un gene di resistenza all'igromicina;un plasmide che codifica un RNA guida di 20 nt target specifico, e un gene di resistenza alla puromicina.
Il complesso SAM legae una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target

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Descrizione

200 µl di Particelle Lentivirali di Attivazione CRISPR/dCas9 ad alto titolo
V-ATPase A2 Le particelle lentivirali di attivazione (m) sono un mediatore di attivazione sinergica (SAM) un sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente ed efficientemente l'espressione genica attraverso la trasduzione delle cellule
V-ATPase A2 Lentiviral Activation Particles (m) contengono i seguenti elementi di Attivazione SAM : una nucleasi Cas9 (dCas9) deattivata (D10A and N863A) fusa al dominio di transattivazione VP64, una proteina di fusione MS2-p65-HSF1 ed un RNA guida target specifico di 20 nt. Contengono anche geni per la resistenza alla blasticidina, igromicina and puromicina
Il complesso SAM lega e una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target
RNA guida nelle Particelle lentivirali d'attivazione V-ATPase A2 (m2) codifica per un RNA guida di 20 nucleotidi target-specifico che differisce dal RNA guida in V-ATPase A2 Particelle lentivirali d'attivazione (m)

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