UPIIIa Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401796-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UPIIIaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UPIIIa (h) e o Plasmídeo Double Nickase UPIIIa (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UPK3A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UPIIIa Anticorpo (C-6): sc-166808
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UPIIIa Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401796-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UPIIIa Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401796-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UPK3A codifica a uroplaquina IIIa (UPIIIa), uma glicoproteína de membrana do tipo I que se associa a outras uroplaquinas para formar placas uroteliais na superfície apical das células “umbrella” da bexiga. Esse complexo sustenta a integridade da barreira epitelial, a especialização de membrana e as respostas ao estiramento mecânico, contribuindo para a diferenciação do urotélio e a homeostase tecidual. Padrões alterados de expressão de uroplaquinas são frequentemente usados como indicadores do estado urotelial e da identidade de linhagem em estudos de desenvolvimento e patologia da bexiga. Assim, alterações relacionadas a UPK3A são relevantes para pesquisas sobre disfunção da barreira urotelial, remodelamento epitelial e fenótipos moleculares associados a contextos de doença da bexiga.
UPIIIa O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UPK3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UPK3A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UPK3A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UPK3A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.