UPII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423621
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UPII O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UPII, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UPII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423621 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Upk2 codifica a uroplaquina II (UPII), um marcador de diferenciação associado a tetraspaninas das células “guarda-chuva” (umbrella) do urotélio, que contribui para a montagem da placa urotelial apical e para a manutenção da barreira urina–sangue. A UPII participa do tráfego de membrana e da formação de complexos de uroplaquinas que organizam microdomínios lipídicos especializados, sustentando a polaridade epitelial e a função de barreira. Alterações na composição das uroplaquinas ou nos programas de diferenciação do urotélio têm sido associadas à perda de integridade da barreira, inflamação e maior suscetibilidade a lesões do trato urinário. Em modelos murinos, a expressão de Upk2 é comumente usada para estudar a identidade de linhagem urotelial e o remodelamento epitelial na fisiopatologia da bexiga.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UPII (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Upk2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Upk2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Upk2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UPII.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Upk2 para a investigação da sinalização de UPII, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Upk2 críticos para a função UPII
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Upk2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UPII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UPII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Upk2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UPII Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UPII (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Upk2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Upk2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.