UGT2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404208

概要

UGT2B4は、内因性ステロイドや胆汁酸関連代謝物に加え、多様な外因性化合物（ゼノバイオティクス）のグルクロン酸抱合（グルクロン酸化）を触媒するヒトUDP-グルクロン酸転移酵素をコードしており、これらの溶解性を高めて排泄を促進します。この第II相の抱合反応活性は、肝臓および腸管における解毒ネットワークに組み込まれているとともに、代謝恒常性や化学ストレス応答を協調的に制御する核内受容体調節経路とも連関しています。UGT2B4の発現量や活性の変動は、ステロイドおよび胆汁酸の処理を変化させ、小分子基質のクリアランスを改変し得るため、薬理学における曝露—反応関係に影響を及ぼします。したがって、UGT2B4は代謝関連表現型や、組織特異的な生体内変換（バイオトランスフォーメーション）能の差異という観点から研究されています。

UGT2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUGT2B4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UGT2B4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UGT2B4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UGT2B4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UGT2B4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UGT2B4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UGT2B4の機能に不可欠なUGT2B4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UGT2B4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UGT2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUGT2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UGT2B4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UGT2B4 HDRプラスミド（h）および UGT2B4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUGT2B4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUGT2B4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。