UDG CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403189

개요

인간 UNG 유전자는 유라실-DNA 글리코실레이스(UDG)를 암호화하며, 이는 염기 절제 복구(base excision repair)의 핵심 효소로서 시토신 탈아미노화로 생성되거나 복제 과정에서 dUMP가 잘못 삽입되어 DNA에 생긴 유라실의 제거를 시작합니다. UNG는 유라실을 절제해 제거하고 이후 단계의 처리를 위한 무염기(abasic) 자리를 형성함으로써, 핵 및 미토콘드리아 유전체 모두에서 게놈 안정성을 유지하고 돌연변이 발생을 제한하는 데 기여합니다. UNG 활성은 복제 스트레스 반응, DNA 손상 신호전달, 그리고 탈아미노화로 유발되는 병변을 억제하는 경로들과 연계되어 있으며, 여기에는 항체 다양화 및 레트로바이러스 DNA에 대한 선천적 제한과 관련된 과정도 포함됩니다. 유라실 복구 및 관련 복구 중간체의 조절 이상은 돌연변이 부담 증가와 게놈 불안정성 표현형과 연관되어 왔으며, 이는 암 생물학, 면역학, 숙주–병원체 상호작용 전반에서 연구되고 있습니다.

UDG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 UNG 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 UNG 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 UNG의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UDG 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UDG 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 UNG 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UDG 기능에 중요한 UNG 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 UNG 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UDG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 UDG CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 UNG 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UDG HDR 플라스미드 (h) 및 UDG HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 UNG 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 UNG 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.