UCP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400319-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UCP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UCP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UCP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UCP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UCP2 Anticorpo (G-6): sc-390189
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UCP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400319-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UCP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400319-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O UCP2 codifica a proteína desacopladora mitocondrial 2, um transportador da membrana interna que modula o vazamento de prótons para ajustar a eficiência da fosforilação oxidativa e o potencial de membrana mitocondrial. Ao influenciar a produção de ROS, o balanço NADH/NAD⁺ e a utilização de substratos, o UCP2 afeta vias bioenergéticas e ligadas ao estado redox, incluindo respostas ao estresse mitocondrial, sinalização do inflamassoma e a dinâmica da secreção de insulina. Alterações na atividade do UCP2 têm sido associadas à desregulação metabólica, a estados de ativação de células imunes e a fenótipos de sobrevivência de células cancerosas, nos quais o acoplamento mitocondrial e a tolerância ao estresse oxidativo atuam como pressões seletivas. Como resultado, o UCP2 é frequentemente estudado no contexto da função mitocondrial, da biologia do estresse oxidativo e da reprogramação metabólica.
UCP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UCP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UCP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UCP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UCP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.