Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UCP2 Double Nickase Plasmid (h): sc-400319-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das UCP2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- UCP2 Double-Nickase-Plasmid (h) und UCP2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf UCP2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: UCP2: sc-390189
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
UCP2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400319-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UCP2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400319-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UCP2 kodiert das mitochondriale Entkopplungsprotein 2, einen Carrier der inneren Membran, der den Protonenleckstrom moduliert und damit die Effizienz der oxidativen Phosphorylierung sowie das mitochondriale Membranpotenzial feinreguliert. Indem UCP2 die ROS-Produktion, das NADH/NAD⁺-Gleichgewicht und die Substratnutzung beeinflusst, wirkt es auf bioenergetische und redoxabhängige Signalwege ein, darunter mitochondriale Stressantworten, Inflammasom-Signalisierung und die Dynamik der Insulinsekretion. Eine veränderte UCP2-Aktivität wurde mit metabolischen Fehlregulationen, Aktivierungszuständen von Immunzellen und Überlebensphänotypen von Krebszellen in Verbindung gebracht, bei denen mitochondriale Kopplung und Toleranz gegenüber oxidativem Stress selektive Vorteile darstellen. Daher wird UCP2 häufig im Kontext der mitochondrialen Funktion, der Biologie des oxidativen Stresses und der metabolischen Reprogrammierung untersucht.
UCP2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des UCP2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von UCP2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die UCP2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit UCP2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.