Ubr4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-427303

개요

Ubr4는 N-레코그닌(N-recognin) 계열의 E3 유비퀴틴 리가아제를 암호화하며, 불안정화된 N-말단 잔기를 인식해 유비퀴틴 의존적 분해를 촉진함으로써 단백질 품질 관리를 지원합니다. 마우스 세포에서 UBR4는 단백질 항상성(proteostasis), 단백질 복합체 안정성 조절, 스트레스 반응성 분해 경로의 조정에 기여하며, 더 넓게는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템과 N-말단 규칙(N-end rule) 경로 생물학과 연결됩니다. 보고된 기능들은 UBR4가 막 수송과 신경 항상성에도 관여함을 시사하며, 유비퀴틴 신호와 단백질체 유지가 교란되는 신경발달 및 신경퇴행 기전 연구에서 중요한 표적이 됩니다. 또한 유비퀴틴화는 세포주기 조절, 신호전달, 세포골격 조직화와 맞닿아 있으므로, Ubr4의 교란은 정상 상태와 질환 연관 상태에서 유비퀴틴 리가아제가 이러한 과정들을 어떻게 미세 조정하는지 규명하는 데 유용합니다.

Ubr4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ubr4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ubr4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ubr4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ubr4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ubr4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ubr4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ubr4 기능에 중요한 Ubr4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ubr4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ubr4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Ubr4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ubr4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ubr4 HDR 플라스미드 (m) 및 Ubr4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ubr4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ubr4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.