Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UBC13 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417204-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBC13O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UBC13 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UBC13 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UBE2N. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBC13 Anticorpo (F-10): sc-376470
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBC13 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBC13 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2N codifica a enzima E2 conjugadora de ubiquitina UBC13, que forma um heterodímero funcional com UBE2V1/UBE2V2 para catalisar a montagem de cadeias de poliubiquitina ligadas a K63. Esses sinais de ubiquitina não proteolíticos coordenam respostas a danos no DNA, sinalização imune inata e inflamatória e a proteostase, influenciando de modo particular a ativação de NF-κB a jusante de receptores como TNFR e TLR/IL-1R, por meio da ubiquitinação de adaptadores da via. A ubiquitinação dependente de UBC13 também contribui para a manutenção do genoma via sinalização por ubiquitina em locais de lesões no DNA. A atividade desregulada de UBE2N/UBC13 tem sido implicada em alterações na sinalização imune e em fenótipos de instabilidade genômica relevantes para estudos de doenças inflamatórias e da biologia do câncer.
UBC13 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UBE2N em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UBE2N. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UBE2N. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UBE2N interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.