UBA52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423573

概要

Uba52は、ユビキチン‐リボソームタンパク質融合体（UBA52）をコードしており、プロセシングを受けてユビキチンとリボソームタンパク質L40を生じます。これにより、ユビキチンの供給とリボソーム生合成、ならびに全体的なプロテオスタシスが結び付けられます。ユビキチン依存的経路を介して、UBA52はプロテアソームによる制御されたタンパク質分解（ターンオーバー）を支え、細胞ストレス応答に影響し、翻訳制御にも寄与します。ユビキチン恒常性およびリボソーム機能の破綻は、プロテオトキシックストレス、細胞周期進行、炎症シグナル伝達の機構に広く関係します。ユビキチン化と翻訳制御はがん生物学や神経変性モデルでしばしば変化するため、Uba52は、プロテオスタシスが細胞の適応度（フィットネス）やストレス適応にどのように影響するかを研究するうえで有用な結節点となります。

UBA52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUba52遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Uba52内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Uba52のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UBA52タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UBA52シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Uba52欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UBA52の機能に不可欠なUba52エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Uba52ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UBA52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUBA52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Uba52遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UBA52 HDRプラスミド（m）および UBA52 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUba52ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUba52標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。