TSSK 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423531

概要

Tssk1は、精巣特異的セリン／スレオニンキナーゼ1（TSSK1）をコードしており、減数分裂後の精子形成に機能する、生殖細胞に限局して発現するキナーゼです。TSSK1は精巣におけるリン酸化依存性シグナル伝達を介して、クロマチン再構築、鞭毛形成、精子細胞の成熟といった精子分化過程に寄与します。モデル系では、TSSKファミリーのキナーゼ活性の破綻が、精子形成不全や雄性の低受胎／不妊表現型と関連することが示されています。マウスでは精巣での発現が非常に高い遺伝子として、Tssk1は生殖細胞の発生や生殖能力を制御するキナーゼ制御経路の解明に広く用いられています。

TSSK 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTssk1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tssk1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tssk1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TSSK 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TSSK 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tssk1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TSSK 1の機能に不可欠なTssk1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tssk1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TSSK 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTSSK 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tssk1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TSSK 1 HDRプラスミド（m）および TSSK 1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTssk1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTssk1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。