TSPYL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423529

概要

Tspyl1は、クロマチン構造の形成や転写制御に関与するとされる、ヌクレオソーム・アセンブリー・プロテイン（NAP）ファミリーの一員であるTSPYL1をコードしています。マウス細胞では、TSPYL1は遺伝子発現プログラムをエピジェネティックに調節することで、細胞周期の進行や分化の制御に関与すると関連付けられており、DNA鋳型転写やクロマチンのアクセス可能性（開放性）といった過程に影響を与えます。クロマチン状態を形成することで、TSPYL1は増殖や細胞ストレス応答を司る経路にも影響し得るため、発生表現型や腫瘍化（オンコジェニック変換）の機構研究において重要性があります。TSPYLファミリータンパク質の制御異常は、増殖制御の変化や疾患に関連する転写シグネチャーと関連して報告されており、機能ゲノミクスにおける標的としての有用性を裏付けています。

TSPYL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTspyl1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tspyl1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tspyl1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TSPYL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TSPYL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tspyl1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TSPYL1の機能に不可欠なTspyl1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tspyl1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TSPYL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTSPYL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tspyl1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TSPYL1 HDRプラスミド（m）および TSPYL1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTspyl1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTspyl1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。