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TSHZ3CRISPR激活质粒(h) | sc-410072-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
TSHZ3CRISPR激活质粒(h2) | sc-410072-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
TSHZ3(teashirt zinc finger homeobox 3)编码一种核内转录因子,其特征是含有 C2H2 型锌指结构域,可在发育和细胞类型特化过程中调控基因表达程序。在人体组织中,TSHZ3 参与对分化与模式形成过程的转录调控,并与更广泛的基因调控网络整合,从而塑造谱系特征与器官发生。TSHZ3 的表达或功能失调与神经发育相关表型及神经环路形成异常有关,因此在研究神经元与间充质谱系中的转录调控时具有重要意义。作为 DNA 结合型调控因子,TSHZ3 常被用于研究影响形态发生、突触发育和细胞命运决定的相关通路。
TSHZ3 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TSHZ3的表达。
TSHZ3 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TSHZ3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TSHZ3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TSHZ3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TSHZ3位点,并能够研究内源性位点上依赖于TSHZ3的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TSHZ3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TSHZ3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。