TSG-6 Plasmide Double Nickase (h): sc-400765-NIC

TNFAIP6 codifica per il gene 6 stimolato dal fattore di necrosi tumorale (TSG-6), una ialaderina secreta indotta da citochine infiammatorie che rimodella la matrice extracellulare tramite interazioni con l’acido ialuronico e con le catene pesanti dell’inibitore inter-α. Catalizzando e stabilizzando complessi acido ialuronico–catena pesante e modulando l’attività delle proteasi, TSG-6 influenza il traffico dei leucociti, l’edema tissutale e l’organizzazione della matrice associata alla riparazione delle ferite. L’espressione di TNFAIP6 è collegata a programmi infiammatori guidati da NF-κB e a segnali del microambiente che plasmano la comunicazione tra stroma e comparto immunitario. Una biologia di TSG-6 deregolata è stata associata a stati infiammatori cronici e allo stroma associato ai tumori, rendendolo un nodo rilevante per studi meccanicistici sull’interazione tra matrice e infiammazione.

TSG-6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TNFAIP6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TNFAIP6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TNFAIP6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TNFAIP6 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.