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TSG-6双切口酶质粒(h) | sc-400765-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TSG-6双切口酶质粒(h2) | sc-400765-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFAIP6 编码肿瘤坏死因子刺激基因 6(TSG-6),这是一种由炎性细胞因子诱导分泌的透明质酸结合蛋白(hyaladherin)。TSG-6 通过与透明质酸以及 inter-α-抑制剂(inter-α-inhibitor)的重链相互作用,重塑细胞外基质。TSG-6 能催化并稳定“透明质酸–重链”复合物,同时调节蛋白酶活性,从而影响白细胞迁移与归巢、组织水肿以及与创伤相关的基质组织结构。TNFAIP6 的表达与 NF-κB 驱动的炎症程序及塑造基质—免疫通讯的微环境信号密切相关。TSG-6 生物学的失调与慢性炎症状态和肿瘤相关基质有关,因此是研究“基质—炎症”串扰机制的重要节点。
TSG-6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TNFAIP6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TNFAIP6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TNFAIP6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TNFAIP6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。