非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
TRPV5 抗体 (B-6): sc-398853. Caki-1 (A), Neuro-2A (B) 和 F9 (C) 全细胞裂解液中 TRPV5 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
TRPV5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-431458
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TRPV5 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在TRPV5基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TRPV5: sc-398345，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TRPV5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-431458 | 20 µg | $397.00 |
概述
Trpv5 编码 TRPV5，它是瞬时受体电位香草素（TRPV）家族中一种对钙离子高度选择性的成员，作为上皮细胞顶端膜的 Ca²⁺ 进入通道发挥作用。在小鼠肾脏远曲小管和连接小管中，TRPV5 支持跨细胞钙重吸收，并与钙结合蛋白（calbindin）介导的缓冲作用以及基底外侧膜通过 NCX1 和 PMCA 的外排过程相协同，从而共同塑造机体的全身钙稳态。该通道活性受细胞内 Ca²⁺ 反馈调控、磷脂酰肌醇信号、pH 以及包括维生素 D 和甲状旁腺激素（PTH）在内的激素调节因子影响，使 TRPV5 与 Ca²⁺ 依赖性信号传导及上皮转运程序相联系。TRPV5 依赖性转运的失调与小鼠模型中对高钙尿、肾结石易感性以及矿物质代谢表型的研究密切相关。
TRPV5 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Trpv5基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Trpv5基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Trpv5开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使TRPV5蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Trpv5缺失的细胞模型，用于TRPV5信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 TRPV5 功能至关重要的 Trpv5 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Trpv5 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 TRPV5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 TRPV5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Trpv5 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 TRPV5 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 TRPV5 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Trpv5同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Trpv5靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。