TP53INP1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402835-LAC

TP53INP1 (proteína nuclear 1 induzível pela p53) é um regulador induzível por estresse que integra programas transcricionais dependentes de p53 com respostas celulares a danos no DNA, estresse oxidativo e privação de nutrientes. A proteína TP53INP1 participa do controle de checkpoints do ciclo celular, da apoptose e da autofagia, em parte por meio de crosstalk com a sinalização de p53 e com vias associadas a MAPK/JNK que moldam a adaptação ao estresse. Alterações na expressão de TP53INP1 foram relatadas em múltiplos contextos de câncer e também estão ligadas a fenótipos inflamatórios e metabólicos, o que a torna um ponto útil para dissecar como a sinalização de estresse influencia decisões de destino celular. Essas funções posicionam TP53INP1 como uma leitura mecanística para estudos de redes transcricionais de estresse e de reprogramação de vias a jusante.

As Partículas de Ativação Lentivirais TP53INP1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TP53INP1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TP53INP1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TP53INP1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TP53INP1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TP53INP1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.