TNF-R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400206-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TNF-R1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TNF-R1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TNF-R1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFRSF1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TNF-R1 Anticorpo (H-5): sc-8436
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TNF-R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400206-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TNF-R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400206-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF1A codifica o TNF-R1, um receptor expresso de forma ubíqua que se liga ao TNF-α para iniciar a transdução de sinal que regula a inflamação, a sobrevivência celular e a morte celular programada. A ligação do ligante promove a montagem de complexos associados ao receptor, que podem ativar as vias canónicas de NF-κB e MAPK para induzir programas génicos de citocinas e de resposta ao stress, ou, em contextos regulatórios específicos, direcionar a sinalização para apoptose e necroptose dependentes de caspases. Por meio dessas bifurcações de via, o TNF-R1 influencia a ativação da imunidade inata, a homeostase tecidual e as respostas de barreira endotelial e epitelial. A sinalização desregulada de TNFRSF1A e variantes que afetam a função do receptor têm sido associadas a fenótipos autoinflamatórios e a mecanismos mais amplos de doença inflamatória, tornando-o um alvo frequente para dissecar o comportamento de redes impulsionadas por TNF.
TNF-R1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFRSF1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFRSF1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFRSF1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFRSF1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.