TMEM98 Plasmide Double Nickase (h): sc-409870-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TMEM98 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TMEM98 Double Nickase Plasmid (h) e il TMEM98 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TMEM98. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TMEM98 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TMEM98 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMEM98 codifica una piccola proteina transmembrana arricchita nei tessuti oculari ed è implicata nella regolazione dell’organizzazione della matrice extracellulare e della segnalazione cellula–cellula alle interfacce tra epitelio e cellule gliali. Studi genetici nell’uomo associano TMEM98 a fenotipi oculari ereditari, tra cui il nanoftalmo e anomalie correlate del segmento anteriore, evidenziandone la rilevanza nei circuiti che governano la crescita oculare e l’omeostasi tissutale. A livello cellulare, TMEM98 è collegata a processi localizzati alla membrana che influenzano il crosstalk tra vie di segnalazione e il mantenimento strutturale, rendendola un bersaglio utile per chiarire come le proteine di membrana modulino programmi di sviluppo e risposte allo stress. La perturbazione sperimentale di TMEM98 supporta lo studio delle relazioni genotipo–fenotipo nello sviluppo dell’occhio e in modelli cellulari rilevanti per la malattia.
TMEM98 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TMEM98 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TMEM98. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TMEM98. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TMEM98 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.